1.Nguyên lý
Môi trường nuôi c y cung c p đ y đ nhu c u dinh dấ ấ ầ ủ ầ ưỡng c n thi t cho s phát tri n c a vi sinhầ ế ự ể ủ v t. Môi trậ ường nuôi c y c n đấ ầ ược ti t trùng trệ ước khi s d ng nuôi c y vi sinh v t.ử ụ ấ ậ
Phân lo i môi trạ ường nuôi c y:ấ
Theo c u trúc: ấ
+ Môi trường l ng: thỏ ường đ nhân gi ng, lên men hay nghiên c u đ c tính c a vi sinh v t; môi ể ố ứ ặ ủ ậ
trường l ng không ch a các ch t làm đ c nh agar, gelatin…ỏ ứ ấ ặ ư
+ Môi trường r n (đ c): có thêm m t hàm lắ ặ ộ ượng nh agar ho c gelatin vào môi trỏ ặ ường l ng đ ỏ ể
làm đ c môi trặ ường. Môi trường r n thắ ường dùng đ phân l p vi sinh v t, quan sát hình thái ể ậ ậ
khu n l c,…ẩ ạ
+ Môi trường bán r n: có c u trúc d ng d o, hàm lắ ấ ạ ẻ ượng ch t t o đ đ c ít h n v i môi trấ ạ ộ ặ ơ ớ ường r n. S d ng đ xác đ nh kh năng chuy n đ ng c a m t s vi khu n.ắ ử ụ ể ị ả ể ộ ủ ộ ố ẩ
Theo thành ph n:ầ
+ Môi trường t ng h p: có thành ph n hóa h c xác đ nh đổ ợ ầ ọ ị ược m t cách chính xác.ộ
+ Môi trường t nhiên:g m nh ng ch t ch a xác đ nh rõ thành ph n, không có công th c hóa h cự ồ ữ ấ ư ị ầ ứ ọ rõ rang. VD: peptone, cao th t, cao n m men,…ị ấ
+ Môi trường hòa tan chu n b s n: hòa tan vào nẩ ị ẵ ước m t hàm lộ ượng nh t đ nh là có đ t t c ấ ị ủ ấ ả
các thành ph n dinh dầ ưỡng c n thi t.ầ ế
2. Phương pháp chu n b môi trẩ ị ường nuôi c yấ
2.1 Chu n b môi trẩ ị ường l ngỏ
Cân chính xác t ng thành ph n dinh dừ ầ ưỡng c a môi trủ ường nuôi c y theo hàm lấ ượng đã đ nhị
Hòa tan t ng thành ph n trong m t lừ ầ ộ ượng nước nh . Sau đó tr n l n t t c các thành ph n dinh ỏ ộ ẫ ấ ả ầ
dưỡng v i nhau và làm đ y lên th tích nh t đ nh b ng nớ ầ ể ấ ị ằ ước.
Ki m tra pH b ng máy đo pH ho c qu tím, dùng NaOH ho c HCl đ đi u ch nh n u pH khôngể ằ ặ ỳ ặ ể ề ỉ ế đúng v i yêu c uớ ầ
Phân ph i môi trố ường vào ng nghi m ho c bình nuôi c y, đóng n p b ng nút bông không ố ệ ặ ấ ắ ằ
th m nấ ước Ti t trùngệ
Hình 2. Các lo i môi trạ ường nuôi c y vi sinh v tấ ậ
2.2 Chu n b môi trẩ ị ường r n và bán r nắ ắ
N u ch y agar trong th tích nấ ả ể ước dùng đ pha môi trể ường
Cân và hòa tan các thành ph n khác c a môi trầ ủ ường trong ½ lượng nước còn l iạ
Tr n l n và làm đ y lên th tích c n thi t, sau đó phân ph i ngay vào ng nghi m ho c bìnhộ ẫ ầ ể ầ ế ố ố ệ ặ nuôi c y khi dung d ch còn nóng. N u đ ngu i, agar s đ c l i và không th rót vào ng ấ ị ế ể ộ ẽ ặ ạ ể ố
nghi m đệ ược n a.ữ
Đóng n p ng nghi m và ti t trùng gi ng v i môi trắ ố ệ ệ ố ớ ường l ng.ỏ
Đ i v i th ch nghiêng: đ t nghiêng khi môi trố ớ ạ ặ ường còn nóng cho t i khi ngu iớ ộ
B o qu n môi trả ả ường đã đông đ c trong t l nh v trí l t ngặ ủ ạ ở ị ậ ược